Polymeraasiketjureaktiota ja sen luonteesta ja laajuudesta

Polymeraasiketjureaktio (PCR) - menetelmä, molekyylibiologian, joka mahdollistaa havaita biologisen materiaalin pieniä määriä deoksiribonukleiinihappo (DNA), tai pikemminkin, joitakin sen fragmenttien, ja kerrottava ne monta kertaa. Sitten ne tunnistetaan visuaalisesti geelielektroforeesilla. Reaktio kehitettiin 1983 K. Mullis ja sisällyttää luetteloon olevien löytöjä viime vuosina.

Mitkä ovat mekanismeja PCR

Koko menetelmä perustuu kykyyn nukleiinihappojen itsereplikoitumaan, että tässä tapauksessa pidettiin keinotekoisesti laboratoriossa. DNA: n replikaatiota ei voi alkaa minkä tahansa molekyylin alueella, mutta vain alueilla, joilla on spesifinen sekvenssi nukleotidien - lähtöaineena fragmentit. Jotta polymeraasiketjureaktion on alkanut, tarvitsemme aluketta (tai DNA-koettimet). Nämä ovat lyhyitä DNA-fragmenttien sekvenssien kanssa tietyn nukleotidisekvenssin. Ne ovat toisiaan täydentäviä (eli vastaten) alkua näytteen DNA-osien.

Tietenkin, luoda alukkeita, tutkijat täytyy tutkia sekvenssin nukleotidin nukleiinihappo, joka on mukana yhteydessä. Nämä DNA-koettimet varmistaa reaktion spesifisyys ja sen aloittamista. Polymeraasiketjureaktio ei mene, jos näyte ei löytänyt ainakin yhden molekyylin halutun DNA. Yleensä reaktio vaatii edellä alukkeita, joukko nukleotideja, lämmönkestävä DNA-polymeraasi. Viimeksi mainittu on entsyymi - katalyyttinen reaktiot synteesi uusia nukleiinihappomolekyylien otannan perusteella. Kaikki nämä aineet, kuten biologisen materiaalin, joka on tarpeen tunnistaa DNA: ta yhdistetään reaktioseokseen (liuos). Se on sijoitettu erityinen termostaatti, joka suorittaa sen erittäin nopean kuumennuksen ja jäähdytyksen määritetyn ajan kuluessa - sykli. Ne ovat yleensä 30-50.

Miten tämä reaktio

Olennaista tässä on se, että yhden jakson aikana, alukkeet on kiinnitetty osia halutusta DNA: ta, jonka jälkeen se menee kaksinkertaistaa entsyymin. Perusteella saatua DNA-säikeet syntetisoida seuraavilla kierroksilla enemmän ja enemmän kappaletta samanlaisia molekyylejä.

Polymeraasiketjureaktio kerätään jatkuvasti talteen sen jälkeen, kun vaiheet. Se tunnettu siitä, että ensimmäinen kaksinkertaistaa tuotteen jokaisen syklin aikana lämmitys ja jäähdytys. Toisessa vaiheessa reaktio tapahtuu hidastus, koska entsyymi on vaurioitunut ja menettää aktiivisuutta. Lisäksi uhanalaisten kantojen nukleotidien ja alukkeita. Viimeisessä vaiheessa - tasanne - tuotteet eivät ole enää kerääntyä reagensseina yli.

Missä sitä käytetään

Epäilemättä, laajimman sovelluksen polymeraasiketjureaktio toteaa lääketieteen ja luonnontieteiden. Sitä käytetään julkisten ja yksityisten biologian, eläinlääketieteen, farmasian ja jopa ekologia. Kun taas jälkimmäinen tekevät seuraamaan elintarvikkeiden laatua ja ympäristön esineitä. Käytetään aktiivisesti polymeraasiketjureaktio Rikostekniseen käytännössä vahvistaa isyyden ja tunnistaminen henkilöllisyyden. Vuonna rikosteknisen tutkimuksen sekä paleontologian, usein tämä menetelmä on ainoa tapa, koska se on yleensä käytettävissä tutkimuksessa erittäin pieniä määriä DNA: ta. Tietenkin hyvin yleisesti käytetty menetelmä löytyy käytännön lääketieteessä. Hän tarvitsi häntä sellaisilla aloilla kuten genetiikan, infektiotautien ja onkologisten tauteja.